血液RNA提取的挑戰(zhàn)與難點(diǎn)
血液是生命科學(xué)研究中最常用的生物樣本之一。然而，由于其成分復(fù)雜且含有大量RNase，血液RNA的提取成為科研中的一大難題。
賽百純生物的解決方案
為了解決這一挑戰(zhàn)，廣州賽百純生物科技有限公司推出了核酸提取或純化試劑盒（血液RNA提取試劑）磁珠法，本試劑盒適用于從新鮮或冷凍的全血（用檸檬酸鹽，EDTA或肝素等抗凝劑處理過的血液樣品）樣本中提取總RNA ，采用特異性結(jié)合RNA的納米磁珠和獨(dú)特的緩沖液體系。硅羥基納米磁珠能高效、專一吸附RNA，可最大限度去除雜質(zhì)蛋白等，提取的RNA純度高，質(zhì)量穩(wěn)定，沒有蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)污染，可直接用于下游實(shí)驗(yàn)。
核酸提取或純化試劑盒（血液RNA提取試劑）磁珠法
特點(diǎn)和優(yōu)勢
· 不使用任何有毒試劑，安全高效，對酚、氯仿等有毒試劑說拜拜；
· 操作簡單，省力氣；無需單獨(dú)裂解紅細(xì)胞，不用離心，直接加樣；
· 單人份提取，靈活可?。?/span>
· RNA 純度高，DNA殘留低；
· 與傳統(tǒng)裂解紅細(xì)胞的方案，同樣操作24個(gè)樣的情況下，能節(jié)省約4個(gè)小時(shí)；
· 耗材廠家注塑，成本價(jià)格可控，同樣的價(jià)格，不一樣的享受。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
某三甲醫(yī)院全血樣本1-8，使用271602血液RNA提取試劑盒對樣本進(jìn)行提取，得到的核酸測量濃度、純度，在跨外顯子區(qū)域（exon spanning primer&probe）設(shè)計(jì)引物，對得到的RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄和非反轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增，計(jì)算 △Ct值。
使用某隆Gentier 96E熒光定量PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增曲線、熔解曲線圖如下：
圖1 逆轉(zhuǎn)錄組樣本擴(kuò)增曲線圖
圖2 無逆轉(zhuǎn)錄組樣本熔解曲線圖
由結(jié)果可知：△CT（不轉(zhuǎn)錄組CT-轉(zhuǎn)錄組CT）均大于5，說明提取后RNA中殘留的基因組DNA較少，所得到的RNA成分純度高，適用于后續(xù)RNA診斷。
配套儀器
MDx-12全自動(dòng)DNA甲基化一體機(jī)
儀器特點(diǎn)：
· 獨(dú)特的混合方式
采用水平偏心運(yùn)動(dòng)加磁套垂直攪拌的組合方式，實(shí)現(xiàn)大體積樣本處理；
· 甲基化一步到位
采用獨(dú)有的雙排11孔試劑條，實(shí)現(xiàn)核酸純化到DNA甲基化一步到位，同時(shí)節(jié)省空間；
· 樣本處理體積大
最高可處理10ml樣本，洗脫體積最小可至20ul，輕松實(shí)現(xiàn)核酸高度濃縮；
· 可自由編程
具有程序分組，便于程序管理；程序自定義編輯功能，操作靈活，可滿足不同試劑的要求；
· 系統(tǒng)后臺(tái)強(qiáng)大
用戶可自定義系統(tǒng)后臺(tái)，并可保存多組后臺(tái)參數(shù)，方便匹配不同的實(shí)驗(yàn)方案；
· 污染控制
1）內(nèi)置紫外消毒模塊，可定時(shí)進(jìn)行紫外消毒；
2）獨(dú)特的定向排風(fēng)結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)，有效避免氣溶膠的污染。
· 工作效率高
2小時(shí)即可實(shí)現(xiàn)12個(gè)樣本的核酸提取純化以及甲基化處理；
· 試劑開放
兼容各種磁珠法核酸提取試劑及DNA甲基化試劑；
· 人性化設(shè)置
甲基化DNA自動(dòng)轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管，無需用戶自己轉(zhuǎn)移；
· 安全可靠
開門后自動(dòng)停止紫外消毒、提取運(yùn)行，保障操作安全。
封閉性實(shí)驗(yàn)艙最大程度減少操作者與試劑的接觸。智能化操作，避免有害物質(zhì)對人體的危害；
· 通量靈活
用戶根據(jù)自己的需求可自由選擇1-12樣本通量，不浪費(fèi)耗材。